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如何解决PCR实验室污染检测问题?

时间:2022-08-04 01:08:00 点击:338次

PCR实验室实验反应的特点是扩展能力大,灵敏度高,但头痛容易污染,极小的污染会导致假阳性。面对许多污染源,如样本交叉污染.试剂仪器交叉污染.克隆质粒污染.PCR扩大产物污染.还有很容易被忽视的气溶胶污染。气溶胶是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散系统。当空气与液体表面摩擦时,如剧烈摇动反应管、打开盖子时.吸样和污染进样枪的反复吸样都会形成气溶胶和污染。这种污染是无声的,无法预防。

虽然这些污染是对的PCR实验结果的影响受到广泛关注,大部分受到广泛关注PCR实验室采取了各种污染控制方法,如定期清理.划分操作区域.试剂分装.操作谨慎.重复实验.多角度验证结果。然而,微量核酸片段可以扩大,因此污染物的控制不仅可以消除和避免,而且需要从源头上控制。目前,大多数生物实验室和分子实验每天都在大规模进行,污染源无处不在。特异性、非特异性、同源性、非同源性,广泛分布在样品容器中.实验室台面,试剂溶液.仪器表面内管附着等。以下是清除这些污染源的方法:

解决PCR实验室检测污染的方法

1.酒精擦拭:核酸沉淀,确保污染表面得到一定程度的缓解(简单).方便.成本低)。

2.修饰:标记遗传物质,防止聚合酶与核酸的结合,从而抑制DNA扩散(效果相对较好)。

3.酶解:酶可将长链核酸分子降解成小片段(快速).效果相对较好)。

4.高压变性:高压可将核酸降解为20-30bp小片段(彻底.成本低)。

5.紫外:PCR嘧啶碱基在产品中形成二聚体,延伸终止(方便).范围广.成本低)。

有实验室的地方,实验室污染是不可避免的。实验室污染不仅会影响实验和科研的质量和效果,还会损害实验室工作人员的健康。PCR实验室要时刻注意污染监测,考虑是否有污染.污染的原因是什么,以便采取措施防止和消除污染。

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