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PCR详细说明实验室建设规范和装修要求

时间:2022-08-06 01:08:00 点击:495次

也称基因扩增实验PCR实验的特点是可以微量DNA大幅增加,PCR它是分子生物学研究和实验的常规方法,广泛应用于生物学的各个领域。例如:艾滋病检测.乙型肝炎.禽疫病.检测和诊断癌基因,DNA指纹.个体识别.亲子鉴定及法医物证.动植物检疫、动物及其衍生品检测、动物饲料.化妆品.食品卫生检测、转基因作物和转基因微生物检测等。

一.PCR实验室布局

PCR原则上,实验室是试剂准备区.样品制备区.扩建区和扩建产品分析区有四个独立的工作区和一个特殊的走廊。每个工作区应设置一个缓冲室,连锁装置应安装在工作区和缓冲区之间。具有不同功能的工作区域应独立分开。每个工作区域都有明显的标志,不能直接连接。如果它们连接紧密,则需要安装项目传输窗口。前两个区域为扩展前区域,后两个区域为扩展后区域。扩展前区域和扩展后区域应严格分开。实验材料.试剂.记录纸.笔.清洁材料等。,只能从扩增前区流向扩增后区,即从试剂准备区→样品制备区→扩增区→扩大产品分析区域,不得反向流动。实验室的气流也应从扩建前区流向扩建后区,不得反向流动。紫外线灯应安装在每个工作区域的顶部,波长为254个nm,每20㎡一支40W的紫外灯。

二.实验室的功能和主要设备

1.试剂准备区:主要制备试剂.包装和主反应混合物的制备。用于样品生产的试剂和材料应直接运输到该区域,不得通过其他区域。试剂原料必须储存在该区域,并在该区域制备所需的试剂。该地区的主要设备有一个平衡点.冰箱.离心机.加样器.振荡器等。

对于气流压力的控制,控制没有严格的要求。

2.样品制备区:主要保存样品.核酸(RNA.DNA)提取.存储和添加到膨胀反应管和测定DNA合成。这个地区的主要设备是冰箱.生物安全柜.离心机.加样器.振荡器.恒温水浴等。

该区域的压力梯度要求为:相对于相邻区域为正压,以避免气溶胶污染从相邻区域进入该区域。

3.扩张区:主要进行DNA扩大。此外,已制备的DNA模板(来自样品制备区)和主要反应混合物(来自试剂制备区)的添加也可以在该区域进行。该地区的主要设备包括:膨胀仪.冰箱.离心机.加样器等。

这区域的压力梯度要求为:相对于相邻区域为负压,避免气溶胶从该区域泄漏。

4.扩增产物分析区:扩增产物的测定。该地区的主要设备包括酶标仪器.洗板机.加样器、水浴等。

该区域的压力梯度要求为:相对于相邻区域的负压,以避免扩增产物从该区域扩散到其他区域。

三.PCR实验室通风系统和压力控制

每个区域之间应有一个单向工艺流.物流.为了避免实验之间的相互干扰,防止气溶胶扩散对实验过程造成污染,人流和气流形成单向流程的保护屏障。

PCR实验室没有严格的净化要求,但为避免各实验区交叉污染的可能性,应采用全送全排的气流组织形式,严格控制交付.排气比例保证了各实验区的压力要求。

四.PCR实验室装饰

实验室围护结构应牢固牢固.气密性好。所有阴阳角应采用圆弧过渡,墙体内壁应光滑干净,墙体内壁应光滑干净.不积尘.耐腐蚀.易于清洁和消毒。地面使用PVC卷材或环氧树脂自流平,材料应满足无缝缝隙.无渗漏.光洁.要求耐腐蚀。

五.PCR实验室注意事项

1.大小设置几个区域,试剂准备区域,.扩增区.扩大产品分析区,空间可以相对较小,样品制备区要放置生物安全柜和低温冰箱,空间要大一些。

2.试剂准备区.在样品制备区设置应急洗眼器,确保操作人员的安全。

3.PCR根据用户的使用情况和资金的投入,实验室没有严格的净化要求。


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